Mikroskopia fluorescencyjna: cechy badawcze

Termin "mikroskopia" ma greckie korzenie. W tłumaczeniu oznacza to badanie obiektów za pomocą precyzyjnych instrumentów. Ostatnio coraz popularniejsza stal luminescencja i mikroskopia elektronowa.

Rozdzielczość

Pod tym pojęciem rozumiem minimumOdległość, na której można zlokalizować różne obiekty. Rozdzielczość sprzętu określi stopień penetracji do świata mikroskopowego, możliwość uwzględnienia wielkości badanego elementu. Z dużym wzrostem granic obiektów może się łączyć. W związku z tym istnieją pewne granice, powyżej których przybliżanie elementów jest bez znaczenia.

Metoda mikroskopii luminescencyjnej: mechanizm

W przemianie energii, która pochłaniasubstancja, do promieniowania widzialnego jest blask. Nazywa się luminescencja. Zjawisko to wynika z faktu, że niektóre substancje pod wpływem światła zaczynają emitować promienie o innej (zwykle dużej) długości fali. Ponadto niektóre obiekty, które mają pewien kolor pod normalnym oświetleniem, pod wpływem światła ultrafioletowego, zmieniają swój kolor.

Specyfika

Obiekt, którego nie można zobaczyć w ultrafiolecieświatło, może promieniować jasny połysk, jeśli jest traktowany specjalną substancją. W nim elementy świecą w różnych kolorach w ciemności. Moc promieniowania jest inna, ale z reguły jest niewielka. Pod tym względem mikroskopia fluorescencyjna jest skuteczna w zaciemnionym pomieszczeniu. W przypadku korzystania z tego typu badań mogą być postrzegane w świetle przedmiotu, który promieniuje. Skład chemiczny tkanek, komórek wpłynie na jakość badania. Mikroskopia fluorescencyjna jest uważana w pewnym stopniu histochemiczne badania.

Klasyfikacja

Mikroskopia fluorescencyjna może być pierwotny lub wtórny. W tym ostatnim przypadku obiekt traktowany jest specjalnymi związkami nadającymi blask. Podstawowy mikroskopia fluorescencyjna opiera się na wewnętrznej zdolności badanego pierwiastka do emitowania światła.

Sprzęt

Mikroskopia luminescencyjna jest wykonywana przy pomocyprzy użyciu różnych urządzeń. Oświetlacz służy jako główny element. Jest wyposażony w lampę ultrafioletową. Ponadto urządzenia używają zestawu filtrów. W niektórych urządzeniach występuje wiele różnych konfiguracji. W zależności od koloru użytego do wzbudzenia luminescencji - ultrafioletowej lub niebieskiej, odpowiedni filtr umieszcza się pomiędzy źródłem światła i badanym obiektem. Ponieważ blask mikroskopijnego elementu jest energetycznie słabszy niż ekscytujące światło, zostanie uwięziony tylko pod jednym warunkiem. Nadwyżka promieni pochodzących ze źródła musi zostać odcięta przez żółto-zielony filtr. Jest on umieszczony na okularze urządzenia. Najbardziej wyraźnym efektem luminescencji będzie filtr całkowicie odcinający promienie wychodzące ze źródła światła.

Na co składa się instalacja w promieniowaniu widzialnym? Ma jasne źródło światła i mikroskop biologiczny. Pomiędzy lustrem urządzenia a lampą zainstalowany jest filtr niebiesko-fioletowy. Może to być FS-1, UFS-3 i tak dalej. Żółty filtr umieszcza się na okularze mikroskopu. Z ich pomocą niebieskie światło pada na obiekt. On także pobudza luminescencję. Ale to światło może przeszkadzać w widzeniu blasku. Dlatego w drodze do oka jest odcięty przez żółty filtr. Oświetlenie jest ustawione zgodnie z metodą Kohlera, z jednym wyjątkiem. Membrana skraplacza musi być całkowicie otwarta. W badaniu ważne jest stosowanie niefluorescencyjnego oleju immersyjnego. Aby zmniejszyć własną emisję, dodaje się nitrobenzen (2-10 kropli / 1 g).

Mikroskopia luminescencyjna: zastosowanie w mikrobiologii

Zalety tego rodzaju badań to:

1. Możliwość uzyskania obrazów kolorowych.
2. Wysoki poziom kontrastu elementów emitujących światło na czarnym tle.
3. Wykrywanie i wykrywanie lokalizacji poszczególnych gatunków wirusów i drobnoustrojów.
4. Możliwość badania przezroczystych i nieprzejrzystych organizmów żywych.
5. Badanie procesów życiowych w ich dynamice.

Trzeba też powiedzieć, że mikroskopia luminescencyjna przyczynia się do opracowania najlepszych metod histo- i cytochemii, szybkiej diagnostyki.